重组TEV 蛋白酶

重组TEV 蛋白酶
          来 源 ： 重 组TEV 蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达。
 产 品 简 介
       重组TEV蛋白酶(His标签)是烟草花叶病毒小核体蛋白a催化结构域基因编码的经高度纯 化的制剂，该酶的生物学功能是在病毒产生过程中将多蛋白体酶解为单一蛋白。与因子Xa、 凝血酶相比，TEV 酶识别序列更加严格。作为生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重 要工具酶，TEV酶识别非常一致的7氨基酸序列：E-Xaa-Xaa-Y -Xaa-Q-P1'(G/S), 酶切 发生在Q 和P1'之间的肽键，最常用的7氨基酸序列是ENLYFQG,P1   '位置可以是不同的 小分子氨基酸，这样目标蛋白从融合蛋白的N 端释放，带自然的N末端或者只多一个氨基酸 的蛋白。该产品是经过了基因工程改造的蛋白酶，稳定性好，在广泛的温度范围具有特异 性。本品来源于重组大肠杆菌，经过高度纯化，比活性达到10,000U/mg。 最适酶切温度 是30℃,但在4℃也具有酶活性。rTEV-H带His标签，酶切后可方便地通过Ni亲和柱层析去除。
 产 品 特 性

中文别名(Chinese synonym)	TEV蛋白酶
英文别名(English synonym)	TEV Protease
来源(Source)	大肠杆菌表达
标签(label)	多聚His标签
纯度(Purity)	经SDS-PAGE及HPLC分析，纯度>90%
分子量(Molecular weight)	27 kDa
缓冲液组分(Buffer)	25mM Tris HCI,pH 8.0,50mM NaCI,1mM NaCI,1 mM TCEP和50%甘油

活力单位：在pH 8.0、温度30℃条件下，一单位的TEV蛋白酶可在一小时内切割>85%of 3 μg的对照底物。
 使 用 方 法
3.1.在EP管中配制如下反应体系(建议)

组分	体积
融合蛋白	20μg
10X TEV Protease Buffer	20μL
ddH20	to 190μL
TEV Protease	10 μL
Total volume	200μL

3.2.30℃孵育，在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液，置于单独的EP管中。
3.3.向上述EP管中加入30 μL2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
3.4.样品全部反应完毕后，样品煮沸5 min, 取40μL进行SDS-PAGE 分析，确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃,延长反应时间，并增加TEV酶用量，以保证酶切效果。
 储 存 和 运 输 稳 定 性
储存稳定性：长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃使用。
 产 品 优 势
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。
纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。